Tamsiojo lauko mikroskopija: esminiai įgūdžiai ir principų žinios
Visų pirma, pakalbėkime apie tamsiojo lauko mikroskopo struktūrą ir charakteristikas, kodėl jis vadinamas tamsaus lauko mikroskopu, kokie eksperimentai gali juo naudoti ir kaip jį gerai naudoti. Turėsite išsamų šio straipsnio supratimą.
Pirmasis yra tamsiojo lauko mikroskopo struktūra. Mūsų kasdieniame gyvenime nėra lengva pamatyti kietųjų dalelių skraidymą dulkėse, tačiau tamsioje patalpoje, jei šviesos pluoštas yra įstrižai nuo durų įtrūkimo, galima pamatyti dulkių daleles, tai yra optinis Dindaro reiškinys. Tamsiojo lauko mikroskopas suprojektuotas pagal šį principą. Jo struktūrinė savybė daugiausia skirta naudoti centrinę šešėliavimo plokštelę arba tamsiojo lauko kondensatorių, paprastai naudojamą kaip parabolinį kondensatorių, kad centrinis šviesos šaltinio pluoštas būtų užblokuotas ir negali patekti į objektyvą per bandinį iš apačios į viršų. Kad šviesa keičia savo kelią ir įstrižai šviečia ant stebimojo pavyzdžio, o bandinys atspindi arba išsibarsčius, kai jis susitinka su šviesa, o išsibarstę šviesa dedama į objektyvą, kad visas regėjimo laukas būtų tamsus. Tai, kas pastebima tamsiame lauke, yra difrakteruotas apžiūrėto objekto šviesos vaizdas, o ne pats objektas, todėl galima pamatyti tik objekto egzistavimą ir judėjimą, o objekto smulkios struktūros negalima atskirti. Tačiau kai patikrintas objektas yra nevienalytis ir didesnis nei 1/2 bangos ilgis, visi difrakcionuotų spindulių lygiai tuo pačiu metu patenka į objektyvo objektyvas, o objekto struktūra gali būti tam tikra prasme. Nors bendras tamsaus lauko mikroskopas aiškiai nemato smulkios objekto struktūros, jis gali atskirti dalelių egzistavimą ir judėjimą aukščiau 0. 0 04 um, o tai yra būdinga, kad paprasti mikroskopai (maksimali skiriamoji geba yra 0,2 UM), ir gali būti naudojama norint stebėti gyvų ląstelių struktūrą ir dalelių judėjimą ląstelėse.
Norint padaryti centrinę šešėliavimo plokštelę, įprastą mikroskopą galima paversti tamsiojo lauko mikroskopu, kol kondensatorius yra nuimamas, o laikiklio skersmuo tinka tamsiojo lauko kondensatoriui montuoti. Kai nėra tamsiojo lauko kondensatoriaus, iš storo juodo popieriaus galima pagaminti centrinę šešėliavimo plokštelę ir uždedama ant filtro rėmo po įprasto mikroskopo kondensatoriumi, taip pat galima gauti tamsų lauko efektą.
Sureguliuokite mikroskopo kondensatorių iki aukščiausios padėties ir suderinkite židinio nuotolį su mažos galios veidrodžiu.
Nuimkite okuliarą, stebėkite ir sureguliuokite diafragmos dydį nuo objektyvo statinės, kad jis būtų lygus objektyvo objektyvo, matomo objektyvo statinėje, matymo lauke.
Centrinį šviesos skydą supjaustykite storu juodu popieriumi. Išorinio žiedo skersmuo yra toks pat kaip ir filtro rėmo, o centrinės dalies dydis yra toks pat kaip ir pakoreguotos diafragmos angos (nedidelis permatomo popieriaus gabalas gali būti dedamas ant kondensatoriaus veidrodžio paviršiaus ties šviesos prožektorių skylute, o šviesos taškas, rodomas ant popieriaus, yra diafragmos diafragmas, o po to gali būti e. Komansinis.
Įdėkite centrinį šviesos skydą ant filtro rėmo ir atidarykite diafragmą, kad stebėtumėte mėginį.
Jei reikia stebėti tamsią lauką su dideliu galingu veidrodžiu, centrinis šviesos skydas turėtų būti perdarytas atsižvelgiant į matymo lauko dydį, sutelkiant dėmesį į didelio galios veidrodį.
Išsaugokite jų pagamintas centrines šešėliavimo plokšteles, kad jas būtų galima naudoti vėlesniuose eksperimentuose.
Taikymo būdas. Įdiekite tamsiojo lauko kondensatorių ant mikroskopo kondensatoriaus laikiklio.
Pasirinkite stiprų šviesos šaltinį, tačiau neleiskite tiesiogiai šviesai patekti į objektyvą, todėl apšvietimui paprastai naudokite mikroskopo lempą.
Tarp kondensatoriaus ir bandinio turėtų būti pridedamas kvapnaus asfalto lašas, kad apšvietimo šviesa būtų visiškai atspindėta kondensatoriuje, o aptikto objekto negalima pasiekti, kad tamsaus lauko apšvietimo negalima gauti.
Šviesos kolektoriaus pakėlimas, nukreipdamas šviesos kolektoriaus fokusavimą prie aptikto objekto, tai yra, apšvitinant aptiktą objektą su kūgio pluošto viršūne. Jei kondensatorius gali judėti horizontaliai ir yra aprūpintas centriniu reguliavimo įtaisu, pirmiausia reikia atlikti centrinį reguliavimą, kad kondensatoriaus optinė ašis ir mikroskopo optinė ašis būtų griežtai tiesioje linijoje.
Pasirinkite objektyvą, atitinkantį kondensatorių, sureguliuokite židinio nuotolį (veikimo metodas yra toks pat kaip ir įprasto mikroskopo) ir raskite stebimą objekto vaizdą.
Galiausiai stebėkite gyvas ląsteles po tamsos lauko mikroskopu ant mokymo platformos. Tamsiame fone galima pamatyti difrakcionuotus ląstelių, branduolių ir organelių šviesos vaizdus.
